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技術(shù)文章   Article首頁(yè)>>技術(shù)文章>>脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性測(cè)試盒?洗滌方法

脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性測(cè)試盒?洗滌方法

點(diǎn)擊次數(shù):855 更新時(shí)間:2021-11-30

脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性測(cè)試盒洗滌方法:

1. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,并盡量避免起泡。

1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體,甩干,每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。

3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。

5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長(zhǎng),但不可超過(guò)30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí),即可終止)。

7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開(kāi)酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測(cè)程序。

9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體

載脂蛋白E抗體

淀粉樣肽前體蛋白抗體

水通道蛋白-2抗體

血管緊張素原抗體

雄激素受體抗體

細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體

軸蛋白1抗體

自噬相關(guān)蛋白9B抗體

自噬相關(guān)蛋白12抗體

自噬相關(guān)蛋白13抗體

自噬相關(guān)蛋白3抗體

整合素樣金屬蛋白酶與4型抗體

磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

/蛋白激酶ATR抗體

去整合素樣金屬蛋白酶18抗體

活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體

銜接蛋白β抗體

銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體

水通道蛋白-9抗體

膜粘連蛋白A3抗體

膜粘連蛋白 A4抗體

自噬相關(guān)蛋白8A抗體

磷酸化蛋白激酶B抗體

磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體


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